Introdução

O HPTLC é uma técnica poderosa no que diz respeito à alta capacidade de processamento de amostras, curto tempo de análise e baixos custos de operação. Nosso estudo de caso demonstra uma rápida identificação de óleos fixos após derivatização com ácido fosfomolibdico.

 

Desafio

Muitas vezes, as técnicas cromatográficas exigem uma etapa de preparação de amostra que consome muito tempo e custo. Em muitos casos, o HPTLC permite analisar várias amostras lado a lado após apenas uma preparação mínima da amostra (por exemplo, dissolução). A identidade de amostras com composição desconhecida pode ser elucidada comparando o padrão da amostra com o dos materiais de referência. Um Teste de Adequação do Sistema (SST) pode ser aplicado para verificar a reprodutibilidade do sistema cromatográfico durante a validação da transferência do método e para qualificar os dados em cada placa.

Descrição do procedimento

O método é baixado da biblioteca de métodos visionCATS. O documento do Word (SOP) é ​​aberto para referência. Na preparação para a análise, uma placa RP-18 HPTLC é pré-lavada com diclorometano e depois seca no forno. Todas as amostras e referências são preparadas de acordo com o SOP (em conformidade com o método USP <203>, Nota de aplicação F-39). O arquivo do método visionCATS é aberto e executado, criando um novo arquivo de análise. Neste arquivo de análise visionCATS é completada a tabela de sequência (Vial ID, descrição das amostras e referências e seleção da posição do rack de cada frasco). Uma imagem da placa limpa pré-lavada sob luz branca é capturada com o TLC Visualizer. As amostras e os padrões são aplicados em banda na placa HPTLC usando o ATS 4, o que garante uma aplicação precisa e confiável. Em seguida, a placa de HPTLC é revelada usando o ADC 2. Para visualização das impressões digitais dos diferentes óleos fixados, a placa revelada é mergulhada em reagente de ácido fosfomolibdico, aquecida a 120°C por 3 minutos e documentada com o TLC Visualizer sob luz branca. Para uma validação de transferência de método bem-sucedida, o SST precisa passar. Se os valores de RF estiverem na faixa especificada, os padrões das amostras desconhecidas e das referências podem ser facilmente comparados com a comparação de imagens visionCATS.